Macroscopic and microscopic morphology of the trachea and lungs of giant anteater (Myrmecophaga tridactyla) / Morfologia macroscópica e microscópica da traqueia e pulmões do tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla)

Giant anteater (Myrmecophaga tridactyla) is a wild mammal distributed in Central and South America; nowadays, it is classified as an endangered species. Research about the macroscopic and histomorphological aspects of its respiratory tract is scarce, and, sometimes, it limits the treatment provided to sick animals and impairs species preservation. Thus, the present study aims to describe the macroscopic and microscopic morphology of its lower respiratory tract, including trachea and lungs. To do so, 12 adult giant anteaters from "Centro de Triagem de Animais Silvestres de Goiânia" (CETAS-GO), Goiás State, Brazil, were used in the research after natural death or euthanasia. Three of these animals were used for macroscopic assessments; they were fixed in 10% buffered formalin and dissected. Trachea and lung tissue samples were collected from nine animals right after death and fixed in 10% buffered formalin for histomorphological analysis; they were processed, embedded in paraffin, and inked with hematoxylin-eosin (HE), periodic acid-Schiff (PAS), and Masson's trichrome. The macroscopic analysis showed that the trachea in this species is proportionally short and presents from 19 to 27 tracheal cartilages. The right lung presents four lobes and the left one, two. The microscopic analysis evidenced respiratory epithelium of the ciliated cylindrical pseudostratified type, without evident goblet cells in the mucosa layer of the trachea and bronchi. The pulmonary visceral pleura is thick, similar to other large domestic mammals - complete septa extend from the pulmonary visceral pleura. In conclusion, the macroscopy and histomorphology of giant anteater's lower respiratory tract, represented by trachea and lungs, are similar to that of other domestic and wild mammals. Pulmonary histomorphology is mainly similar to that of pigs and ruminants: it has thick visceral pleura that emits complete septa of conjunctive tissue, which enable lobular parenchymal architecture.(AU)

O tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) é um mamífero silvestre com distribuição na América Central e do Sul e, atualmente, encontra-se classificado como ameaçado de extinção. Pesquisas acerca dos aspectos macroscópicos e histomorfológicos do seu sistema respiratório são escassas, o que, por vezes, limita o tratamento e o manejo de eventuais animais doentes, bem como a preservação da espécie. Desse modo, o objetivo deste estudo foi descrever a morfologia macroscópica e microscópica do aparelho respiratório inferior do tamanduá-bandeira, incluindo traqueia e pulmões. Para tanto, foram utilizados 12 tamanduás-bandeiras adultos, provenientes do Centro de Triagem de Animais Silvestres de Goiânia (CETAS-GO), Goiás, Brasil, após morte natural ou eutanásia. Destes, três foram utilizados para o estudo macroscópico, sendo fixados em formalina tamponada a 10% e dissecados. Para a análise histomorfológica, amostras teciduais da traqueia e do pulmão foram colhidas de nove animais logo após o óbito, fixadas em formalina tamponada a 10%, processadas, incluídas em parafina e coradas com hematoxilina e eosina (HE), ácido periódico-Schiff (PAS) e tricrômico de Masson. À análise macroscópica notou-se que a traqueia é proporcionalmente curta, apresentando 19 a 27 cartilagens traqueais. O pulmão direito apresenta quatro lobos e o esquerdo dois. À análise microscópica foi constatado epitélio respiratório do tipo pseudoestratificado cilíndrico ciliado, sem células caliciformes evidentes na camada mucosa da traqueia e dos brônquios. A pleura visceral pulmonar é espessa, assim como nos grandes mamíferos domésticos, e, a partir desta, estendem-se septos completos. Conclui-se que a macroscopia e a histomorfologia do sistema respiratório inferior do tamanduá-bandeira, representado pela traqueia e pulmões, são semelhantes àquelas de outros mamíferos domésticos e silvestres. A histomorfologia pulmonar é especialmente semelhante à de suínos e ruminantes, com a pleura visceral espessa e emitindo septos completos de tecido conjuntivo, que conferem arquitetura parenquimal lobular.(AU)

Biochemical parameters of the giant anteater (Myrmecophaga tridactyla Linnaeus, 1758) of the Brazilian Cerrado / Parâmetros bioquímicos de tamanduás-bandeiras (Myrmecophaga tridactyla Linnaeus, 1758) do cerrado brasileiro

The giant anteater (Myrmecophaga tridactyla) is classified as a vulnerable species on Brazil's list of species at risk of extinction mainly due to deforestation and forest fires. This has contributed to a considerable increase in detailed clinical case records of the treatment of wild species at veterinary institutions. However, the paucity of serum biochemical profiles of healthy giant anteaters has made it difficult to evaluate these animals, preventing diagnosis, treatment and prognosis. The objective of this work was to collect data about the biochemical profile of healthy giant anteaters from the Brazilian Cerrado raised in captivity, in order to better understand the physiological characteristics inherent to this species. Eighteen analytes from 12 healthy giant anteaters were measured. The following means and standard deviations were found in the biochemical analyses: albumin 3.29±0.33g/dL, ALT 15.49±7.98 IU/L, amylase 1037.92±149.04 IU/L, AST 21, 12±7.50 IU/L, total cholesterol 62.79±20.08mg/dL, HDL cholesterol 14.73±4.98mg/dL, LDL cholesterol 26.60±11.05mg/dL, VLDL cholesterol 2.14±1.06mg/dL, CK 111.61±70.16 IU/L, creatinine 1.05±0.37mg/dL, iron 194.64±81.17µg/dL, GGT 65.18±54.57 IU/L, glucose 103.71±29.63mg/dL, globulins 2.76±0.36g/dL, lipase 28.80±5.11 IU/L,TSP 6.05±0.56g/dL, triglycerides 10.71±5.29mg/dL, and urea 53.46±18.28mg/dL. The values found in this study can be used as references for the laboratory evaluation of giant anteaters living in conditions similar to those of this study. This is one of the first reports of biochemical examinations on giant anteaters of the Cerrado biome.(AU)

O tamanduá-bandeira (Myrmecophaga tridactyla) está classificado como espécie vulnerável na lista brasileira de espécies ameaçadas de extinção devido principalmente ao desmatamento e aos incêndios florestais. Tal fato contribuiu com o aumento da casuística de atendimento de espécies silvestres em instituições veterinárias. Porém, a escassez de valores bioquímicos séricos em tamanduás-bandeiras hígidos tem dificultado a avaliação destes animais, impedindo o diagnóstico, tratamento e prognóstico. O objetivo deste trabalho foi fornecer dados sobre o perfil bioquímico de tamanduás-bandeiras saudáveis do cerrado brasileiro, criados em cativeiro, a fim de compreender melhor as características fisiológicas inerentes a esta espécie. Foram mensurados 18 analitos de 12 tamanduás-bandeiras hígidos. As médias e o desvio padrão correspondentes às análises bioquímicas foram: albumina 3,29±0,33g/dL; ALT 15,49±7,98 UI/L; amilase 1037,92±149,04 UI/L; AST 21, 12±7,50 UI/L; colesterol total 62,79±20,08mg/dL; colesterol HDL 14,73±4,98mg/dL; colesterol LDL 26,60±11,05mg/dL; colesterol VLDL 2,14±1,06mg/dL; CK 111,61±70,16 UI/L; creatinina 1,05±0,37mg/dL; ferro 194,64±81,17µg/dL; GGT 65,18±54,57 UI/L; glicose 103,71±29,63mg/dL; globulinas 2,76±0,36g/dL; lipase 28,80±5,11 UI/L; PST 6,05±0,56g/dL; triglicerídeos 10,71±5,29mg/dL; ureia 53,46±18,28mg/dL. Os valores encontrados neste estudo podem ser utilizados como referência para a avaliação laboratorial de tamanduás-bandeiras que vivam em condições similares ao do presente estudo. Este é um dos primeiros estudos a relatar exames bioquímicos em tamanduás-bandeiras do bioma cerrado.(AU)

Identification of ultrastructural and functional damages in sperm from six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus) due to cryopreservation / Identificação de danos ultraestruturais e funcionais em espermatozoides de tatus-peba (Euphractus sexcinctus) oriundos da criopreservação

The aim of the study was to cryopreserve the semen of six-banded armadillos (Euphractus sexcinctus) in Tris-yolk and glycerol diluent, and to determine the damage caused by the freezing-thawing process, using fluorescent markers and ultrastructural analysis. Semen samples (n=11) collected from 4 adult six-banded armadillos by electroejaculation were cryopreserved in Tris diluent plus 20% egg yolk and 3% glycerol, in a fast freezing curve. Classical analysis of samples was performed after dilution, refrigeration and thawing, followed by fluorescence analysis, using a combination of fluorescent probes to assess membrane integrity (propidium iodide - PI and Hoechst - H342), and mitochondrial activity (CMXRos - Mito Tracker Red®). We also used the ultrastructural analysis to verify possible morphological alterations caused by cryoinjuries. When compared with fresh samples, we verified a significant decline in all the armadillos' semen parameters after thawing, in which only 6.1% motile sperm were found. However, the percentage of sperm which remained with viable (13%) and functional (24.7%) membranes after thawing suggests that some cells could be live but immotile. Analysis using fluorescent markers revealed that the mitochondria of armadillos' sperm is highly sensible to the freezing protocol and the findings through ultrastructure analysis proved this statement. Additionally, the images obtained by transmission electron microscopy revealed that frozen-thawed sperm presented damaged plasma membrane, nuclear modifications as changes in chromatin and acrossomal changes relative to sperm capacitation. In conclusion, this study is the first attempt to cryopreserve the semen of an armadillo species, and to help us to identify critical points on the freezing-thawing procedure in order to improve the protocol.(AU)

O objetivo deste estudo foi criopreservar o sêmen de tatus-peba (Euphractus sexcinctus) em diluente Tris-gema e glicerol, e determinar os danos causados pelo processo de congelação-descongelação, utilizando marcadores fluorescentes e análise ultraestrutural. As amostras de sêmen (n=11) coletadas de 4 tatus-peba adultos por eletroejaculação foram criopreservadas em diluente Tris acrescido de 20% de gema de ovo e 3% de glicerol, em curva rápida de congelação. A análise clássica das amostras foi realizada após a diluição, refrigeração e descongelação, seguida por análise de fluorescência, utilizando uma combinação de sondas fluorescentes para avaliar a integridade da membrana (Iodeto de Propídio - PI e Hoechst - H342), e a atividade mitocondrial (CMXRos - Mito Tracker RED®). Foi também utilizada a análise ultraestrutural para verificar possíveis alterações morfológicas causadas pela crioinjúria. Quando comparadas com as amostras a fresco, verificou-se uma queda significativa em todos os parâmetros seminais dos tatus após a descongelação, em que apenas 6,1% de espermatozoides móveis foram encontrados. No entanto, o percentual de espermatozoides que permaneceu com membrana viável (13%) e funcional (24,7%) após a descongelação sugere que algumas células podem estar vivas, mas imóveis. Análises utilizando marcadores fluorescentes revelaram que as mitocôndrias dos espermatozoides de tatus são altamente sensíveis ao protocolo de congelação e os achados através da análise ultraestrutural comprovaram esta afirmação. Além disso, as imagens obtidas por microscopia eletrônica de transmissão revelaram que espermatozoides congelados-descongelados apresentaram membranas plasmáticas danificadas, modificações nucleares como alterações na cromatina, e alterações acrossomais relativas à capacitação espermática. Em conclusão, este estudo é a primeira tentativa de criopreservação de sêmen em uma espécie de tatu, e nos auxiliou a identificar pontos críticos no processo de congelação-descongelação, a fim de melhorar o protocolo.(AU)